Histoplasmose: um risco ocupacional entre pesquisadores que realizam trabalho de campo? / Is the histoplasmosis an occupational hazard between the investigators who perform field work?

A histoplasmose é micose sistêmica causada por Histoplasma capsulatum. A infecção humana ocorre pela inalação de microconídios encontrados em solo contendo excretas de aves e/ou morcegos. Neste estudo foi enfatizado o potencial das atividades profissionais praticadas em cavernas em possibilitar risco de infecção por Histoplasma. Utilizando-se questionário semi estruturado, foram obtidas informações sobre o trabalho de campo executado por um grupo de 15 biólogos. A presença de anticorpos séricos anti-H.capsulatum foi avaliada em amostras de sangue coletadas desses profissionais. Na entrevista, 87 por cento dos indivíduos relataram frequentes visitas a cavernas, 53 acampamento no interior das grutas; 33 por cento captura de morcegos e 53 por cento de coleta de amostras de solo. A maioria das cavernas situa-se nas regiões sudeste e centro-oeste do Brasil. A detecção de anticorpos por imunodifusão dupla demonstrou que 20 por cento dos soros reagiram com o antígeno de H. capsulatum. Por immunoblotting, houve 94,1 por cento de reconhecimento específico da fração de 94 kDa, sugerindo-se que os indivíduos entraram em contato com H. capsulatum. Este estudo sugere fortemente que a prática da espeleologia propicia a exposição dos indivíduos a espécies fúngicas que habitam saprofiticamente o meio ambiente, especialmente H. capsulatum, configurando-se como potencial fator de risco para infecções.

Analysis of Paracoccidioides brasiliensis exoantigens stability

Diagnosis by isolation of the microorganism from cultures provides the strongest evidence of infection by Paracoccidioides brasiliensis (Pb). However, isolation is not always possible and serological tests such as double immunodiffusion (ID) must be often employed. We analyzed the reaction profile of 75 serum samples from paracoccidioidomycosis (PCM) patients, by using ID, against nine different antigenic preparations of Pb: somatic antigen (SoAg), produced from Pb113 and Pb339 strains; cell-free antigen (CFAg), produced from Pb113 strain – both preparations were cultured in Fava-Netto's agar medium for 7 days at 36°C; metabolic antigen (MAg), produced from Pb113 and Pb339 strains cultured in liquid NGTA (neopeptone, glucose, thiamine and asparagine) medium for 20 days at 36°C; soluble components of the cell wall outer surface (SCCWOS), produced from Pb113 strain cultured in Fava-Neto's agar medium at 36°C for 5, 10, 15, and 20 days; and Pb113 Negroni and Pb113 NGTA antigens, cultured for 20 days at 36°C. Serum samples reactivity was 90% to AgSo and SCCWOS cultured for 5, 10, 15 and 20 days; 86.6% to CFAg; 83.3% to MAg; 80% to Pb113 NGTA antigen; and 76.6% to Pb113 Negroni antigen. Electrophoresis in 10%SDS-PAGE showed high complexity of the protein fractions of SCCWOS, Pb113 Negroni and Pb113 NGTA antigens, which presented molecular weight between 25 and 170 kDa. Specificity and sensitivity of SCCWOS against serum pool from patients with chronic and acute forms of the disease were confirmed by immunoblot, which demonstrated that 25, 43, 60, 70, 85 and 160-kDa antigenic fractions of SCCWOS cultured for 5 and 10 days showed intense reactivity. We could demonstrate that SCCWOS of Pb are stable and show highly preserved antigenic fractions, which was proved by their high reactivity pattern to sera from different forms of PCM, anti-Pb antigen and anti-gp43 antisera.(AU)

Análise da estabilidade de exoantígenos de Paracoccidioides brasiliensis

O diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), baseia-se na demonstração do P. brasiliensis (Pb) em amostras biológicas e, indiretamente, por meio de provas sorológicas, sendo a especificidade e sensibilidade diretamente relacionadas à preparação antigênica empregada. A estabilidade de exoantígenos de Pb, produzidos há 15 anos, foi avaliada comparando o perfil de reatividade, por ID, de 75 soros de pacientes com PCM frente a nove diferentes preparações antigênicas: antígeno somático (AgSo) e antígeno metabólico (AgM) obtidos das amostras 113 e B-339, antígeno “cell free antigen” (AgCFA) obtido da amostra 113; componente solúvel da superfície externa da parede celular de Pb (CSSEPC de Pb) obtido da amostra 113 e cultivado em ágar Fava Neto, a 36° C durante 5, 10, 15 e 20 dias, antígeno 113 Negroni e antígeno 113 NGTA cultivados por 20dias a 36o C. Por ID verificou-se que a reatividade dos soros de pacientes com PCM foi de 90% para AgSo e CSSEPC de 5, 10, 15 e 20 dias; 86,6% para AgS; 83,3% para AgM; 80% Ag 113 NGTA e 76,6% para Ag113 Negroni. A análise do perfil eletroforético revelou grande complexidade das frações protéicas dos CSSEPCs e exoantígeno 113 Negroni e NGTA, apresentando proteínas com massa molecular entre 25 a 170 kDa. Por “immunoblotting”, confirmou-se a especificidade dos CSSEPC frente a pool de soros da forma crônica bem como da aguda, observando-se que CSSEPC obtidos no 50 e 100 dia, apresentaram intensa reatividade das frações antigênicas de 25, 43, 60, 70, 85 e 160 kDa. Concluímos que os CSSEPC além de estáveis, apresentam determinantes antigênicos altamente conservados, fato comprovado, pelo alto padrão de reatividade observado frente a soros das diferentes formas clínicas de PCM, anti-soros anti-exoantígeno de Pb e anti-gp43

Análise da estabilidade de exoantígenos de Paracoccidioides brasiliensis / Study of stability of Paracoecidioides brasiliensis exoantigens

O diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), baseia-se na demonstração do P. brasiliensis (Pb) em amostras biológicas e, indiretamente, por meio de provas sorológicas, sendo a especificidade e sensibilidade diretamente relacionadas à preparação antigênica empregada. A estabilidade de exoantígenos de Pb, produzidos há 15 anos, foi avaliada comparando o perfil de reatividade, por ID, de 75 soros de pacientes com PCM frente a nove diferentes preparações antigênicas: antígeno somático (AgSo) e antígeno metabólico (AgM) obtidos das amostras 113 e B-339, antígeno “cell free antigen” (AgCFA) obtido da amostra 113; componente solúvel da superfície externa da parede celular de Pb (CSSEPC de Pb) obtido da amostra 113 e cultivado em ágar Fava Neto, a 36° C durante 5, 10, 15 e 20 dias, antígeno 113 Negroni e antígeno 113 NGTA cultivados por 20dias a 36o C. Por ID verificou-se que a reatividade dos soros de pacientes com PCM foi de 90% para AgSo e CSSEPC de 5, 10, 15 e 20 dias; 86,6% para AgS; 83,3% para AgM; 80% Ag 113 NGTA e 76,6% para Ag113 Negroni. A análise do perfil eletroforético revelou grande complexidade das frações protéicas dos CSSEPCs e exoantígeno 113 Negroni e NGTA, apresentando proteínas com massa molecular entre 25 a 170 kDa. Por “immunoblotting”, confirmou-se a especificidade dos CSSEPC frente a pool de soros da forma crônica bem como da aguda, observando-se que CSSEPC obtidos no 50 e 100 dia, apresentaram intensa reatividade das frações antigênicas de 25, 43, 60, 70, 85 e 160 kDa. Concluímos que os CSSEPC além de estáveis, apresentam determinantes antigênicos altamente conservados, fato comprovado, pelo alto padrão de reatividade observado frente a soros das diferentes formas clínicas de PCM, anti-soros anti-exoantígeno de Pb e anti-gp43